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人乳腺管癌細胞的傳代及凍存

人乳腺管癌細胞的傳代及凍存
細胞傳代:
  1)細胞(人乳腺管癌細胞)生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
  2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化,再輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;
  3)棄上清,沉淀細胞用12ml完全培養基重懸,然后按1:2比例進行分瓶傳代,*后放入37℃,5%CO2細胞培養箱中培養;
  4)待細胞完全貼壁后,觀察培養結果,之后進行換液培養或傳代。

細胞凍存:
  1)細胞(人乳腺管癌細胞)生長至覆蓋培養瓶的80%面積時,棄25cm2培養瓶中的培養液,用PBS清洗細胞一次;
  2)添加0.25%胰蛋白酶消化液約1ml至培養瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細胞回縮變圓后加入完全培養液終止消化,輕輕吹打細胞使之脫落,然后將懸液轉移至15ml離心管中,1000rpm離心5min;

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