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如何培養(yǎng)LLC1細(xì)胞(二)?

如何培養(yǎng)LLC1細(xì)胞(二)?
  如果漂浮的死細(xì)胞多,說(shuō)明細(xì)胞有很多老化的,建議每次傳代的時(shí)候,在用胰酶消化之前,用PBS將細(xì)胞漂洗一遍,胰酶消化的時(shí)間要把握好,37℃2-3min即可,及時(shí)終止反應(yīng),否則胰酶消化過(guò)度對(duì)細(xì)胞損傷較大,也會(huì)有很多死細(xì)胞出現(xiàn)的;吹打細(xì)胞的動(dòng)作要輕柔。
  體外培養(yǎng)的細(xì)胞,不論是元代細(xì)胞還是傳代細(xì)胞一般不包吃體內(nèi)原有的細(xì)胞形態(tài)。但大體可以分為兩種基本形態(tài):成纖維樣細(xì)胞(LLC1細(xì)胞)與上皮樣細(xì)胞(LLC1細(xì)胞)。此外還有一些可移動(dòng)的游走細(xì)胞。
  某些傳代細(xì)胞還可用懸浮方法培養(yǎng)。
  對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
  此培養(yǎng)條件比較復(fù)雜,懸浮培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn)是能同時(shí)獲得大量細(xì)胞。


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